一、外觀

拿到血清，最先接觸的是血清外觀，對于缺少細胞培養經驗的人來說，外觀的判斷尤為重要

1、顏色

根據血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現出黃色或紅色，我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl，實際上，血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響，這個指標的意義在于能體現出采血過程的嚴謹規范程度，良好的操作能降低血清的溶血。國產血清的采血點很分散，大多是由屠戶采血后馬上離心收集，所以很少會有溶血，表現出明亮的蠟黃色，當然，國產血清也很少有標準意義上的胎牛血清。進口胎牛血清或多或少總有點溶血，因為真正的胎牛血清凝血功能差，紅細胞容易破裂。總的來說，國產的血清呈現出蠟黃。進口的血清，質量最好的呈現出談黃、微紅色。當然，熱滅活血清或保存不當的血清，由于血紅蛋白的破壞氧化，會呈現出暗紅，甚至咖啡色。

2、沉淀：很多血清客戶，會發現進口血清有沉淀，從而懷疑血清的質量問題，這是沒有根據的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產生，對血清質量沒有任何影響，沉淀的產生原因很多，和廠家的加工生產方式密切相關。國產的血清，大多來自北方，由于價格低廉，保存環境都不好，從采血、冷凍、運輸到生產會經過多次凍融，每次凍融過程，就會析出部分纖維蛋白沉淀，這樣，血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”，很少有沉淀產生。進口的胎牛血清，過濾分裝前很少會反復凍融，生產后的成品也是清澈的，但隨著時間的推移，血清中的大量纖維蛋白會析出形成沉淀。當然，進口的新生牛血清，一般牛齡都在2周左右，血清中的各種蛋白含量明顯偏高，生產后血清可能會渾濁，甚至有大量沉淀。當然，購買回來的血清都是冰凍狀態，使用時需要融化，融化過程最好在溫度較低的狀態下慢慢進行，否則沉淀相對較多，雖然沉淀并不直接影響血清的質量，但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙。

3、澄清度進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質含量低，表現為稀薄、清淡，而國產血清，因為絕大多數是新生牛血清，相對而言更加粘稠，顏色略深，這對于初步接觸血清的人很難判斷，但把兩者進行對比，可容易分辨。

二、主要技術指標

目前國內血清的質量標準是2005版的《中華人民共和國藥典》，主要指標有以下幾點：

1、內毒素標準為不高于5EU/ml

內毒素是細菌破碎后細胞壁的成分，因此內毒素含量的高低可表現出采血到生產一系列過程中的無菌操作情況。目前，國產血清基本都能達到這一要求，很多進口胎牛血清內毒素含量反而更高，內毒素含量偏高不影響質量，除非含量極高，預示著已經污染。

2、總蛋白含量胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml

數值偏高，說明采血的牛齡偏大，不是胎牛，數值偏低，表明血清可能摻水了。

3、血紅蛋白標準為不高于20mg/dl

顏色越紅，數值越高，反之，數值越低。

4、pH

國產血清、大多高于7.5，進口胎牛血清，大多低于7.5，具體原因未知，可能和牛齡有關，這也能用來初步鑒別血清的來源。

5、微生物

包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。隨著國內血清廠家生產條件的改善提高，細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制，支原體經過0.1um過濾，大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的，主要是生產環境過程中帶入，又無法過濾，很難徹底清除，但對血清質量影響不大。病原性病毒，特別是BVDV，在國產血清中幾乎90%以上都存在，這類微生物是影響國產血清質量的重要因素之一，而進口胎牛血清中基本都控制的很好。

6、免疫球蛋白

國產血清的只是定性檢測，結果也很不準確，進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能完全體現出采血的時的牛齡情況，國產血清，基本都是新生牛的，血清中容易產生IgM，IgG的含量也偏高，進口胎牛血清，不含IgM，IgG的含量也較低。

7、其它

不管是國產還是進口血清，都是不測抗生素的（無四環素胎牛血清除外）。國外，抗生素的使用很嚴格，用量也很少，每頭奶牛的產品包括血清都可以溯源的，因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低；國內，抗生素的濫用已成了普遍現象，血清中殘留很高，對細胞培養極為不利，這是國產血清質量差的根本原因。

三、血源

市場上的血清血源主要分為中國、北美、南美和澳洲。

1、國產血清質量差，這是公認的，主要原因并不是生產廠家的責任，而是天然環境差和抗生素的大量使用。國內環境污染嚴重，同時飼養過程中抗生素極其濫用，有毒有害物質會大量殘留在血清中，最終不利于細胞的生長。

2、南美血清，來源很多，如Bioind的巴拿馬、Gibco的烏拉圭、巴西等，這些血清由于采血的不可控性，質量參差不齊，當然，相對于國內血清來說好的多。另外，國內銷售的南美血清大多顏色鮮紅，如Sera Pro、Bioind、Gibco、Hylone等品牌，但阿根廷的血清例外，這可能和各國的采血、生產工藝有關。

3、北美血清，主要來自美國和加拿大，如Sera Pro的S742S-500，Hclone的SH30396、SH30070、SH30071、Gibco的16000-044、26140-079等。這類血清，等級越高的顏色越淡，表現為淡黃中帶一點微紅，SH30070和SH30396對比就很明顯，特級胎牛血清基本就能進行干細胞培養。北美血清還有一個顯著特點就是每瓶血清都能溯源，這對一些大型的疫苗廠、藥廠尤為重要。

4、澳洲血清，來源主要是新西蘭和澳大利亞，這是在北美血清禁運之后進入中國市場的，一般不具有溯源功能，由于生產、運輸等原因，價格相對來說比較貴。

四、血清使用常見問題

1、血清保存的最好方法？

我們建議血清最好保存在-20℃保存。若一次使用不完一瓶，建議無菌分裝于適當的滅菌容器內冷凍備用。

2、如何解凍血清，才能保證其質量不會受損？

我們建議將血清從冷凍箱取出后，置于2℃～8℃冰箱中解凍，然后在室溫下全融，解凍過程中必須規則地搖晃均勻。

3、為什么血清在解凍后會出現絮狀沉淀？應該怎樣處理？

血清中絮狀沉淀產生的原因有很多，其中最普遍的還是由于血清中脂蛋白的變性所致，而血纖維蛋白（形成凝血的蛋白之一）在血清解凍后，也會存在于血清中，這也是造成沉淀的主要原因，但這些絮狀沉淀并不影響血清本身的質量。欲去除沉淀，可采取自然沉降法或者將血清分裝于無菌離心管中，2000～3000rpm離心5min。一般不建議用過濾的方法去除絮狀沉淀，因為沉淀會阻塞濾膜，造成過濾困難或無法過濾。

4、為什么要熱滅活血清？有必要熱滅活嗎？

加熱可以滅活血清中的補體系統，使補體去活化。通常未滅活的補體能夠刺激平滑肌收縮、肥大細胞和血小板組胺的釋放、激活淋巴細胞和巨噬細胞，同時還能夠參與溶解細胞的過程。

諸多研究表明大多數細胞的培養無須進行血清的熱滅活；而在免疫學研究和ES細胞、昆蟲細胞、平滑肌細胞的培養過程中，推薦使用熱滅活血清。實驗顯示，經正確熱滅活處理的血清，對細胞的生長只有微小的促進或完全沒有促進作用，而通常因為高溫處理影響了血清的質量，造成細胞生長速率降低。并且熱處理過的血清，沉淀物明顯增多，倒置顯微鏡下觀察呈“小黑點”，往往會使研究者誤以為是血清受到了污染，而把血清放于37℃中，沉淀物又會更增多，有會使研究者誤認為是微生物的分裂增殖。因此我們建議若非必須，可以不進行熱處理，既節省時間又確保質量。

5、如何避免沉淀物的產生？

建議您在血清使用的過程中，采用正確的解凍方法（冷凍→4℃→室溫），若血清解凍時改變的溫度太大（如冷凍→37℃）非常容易產生沉淀物。溫度過高、時間過久、搖晃不均勻等，都會造成沉淀增多，我們建議如非必要無須對血清進行滅活；若必須熱滅活，應嚴格遵守56℃，30min的原則，并隨時搖晃均勻。

*以上內容來自網絡